Analisis Genetik Molekul Dan Imunohistokimia Bagi Gen Peninoas Tumor P53 Dalam Pesakit Tumor Otak Di Malaysia

Loading...
Thumbnail Image
Date
2002-04
Authors
Mohamed Yusoff, Abdul Aziz
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Progresi kanser manusia adalah hasil daripada satu kombinasi perubahan genetik yang melibatkan proto-onkogen dan gen penindas tumor. Dalam tumor otak, perubahan genetik yang biasa dilaporkan adalah penglibatan mutasi atau penyahaktifan bagi gen penindas tumor p53. Untuk menentukan samada gen p53 memainkan peranan dalam onkogenesis pesakit tumor otak di Malaysia, 48 tisu tumor sejuk beku telah dianalisa untuk mengesan kehadiran mutasi gen penindas tumor p53. Empat kawasan titik panas dalam ekson 5 hingga 8 gen p53 telah diampifikasi melalui tindak balas rantaian polimerase (PCR). Analisis mutasi telah dijalan ke atas produkproduk PCR tersebut melalui penggunaan teknik tanpa-isotop polimorfisme konformasi bebenang tunggal (SSCP) secara sejuk dan kemudiannya dipastikan melalui analisis penjujukan DNA. Pewarnaan imunohistokimia telah dilakukan ke atas spesimenspesimen tumor pembenaman lilin parafin dengan menggunakan antibodi monoklon 00-7 untuk pengekspresian protein p53. Kekerapan mutasi gen p53 dalam tumor otak yang dikaji adalah 25% (12 daripada 48 kes). Enam kes (50.0%) mutasi dikesan dalam ekson 7, E;lmpat (33.3%) mutasi dalam ekson 8 dan dua (18.1%) mutasi dalam ekson 6. Tiada mutasi yang berlaku dalam ekson 5. Lapan (66.7%) daripada 12 kes mutasi adalah mutasi titik nukleotida tunggal yang terdiri daripada 6 mutasi salah erti, 1 mutasi - - - -tak bererti dan 1 mutasi senyap. Empat yang lain (33.3%) adalah mutasi anjakan rangka yang disebabkan oleh penambahan (3 kes) atau delesi (1 kes) bes. Di kalangan jenis penukargantian bes, transisi dan tranversi telah menunjukkan peratusan yang sama (50%). Dalam mutasi transisi, kesemua kes telah menunjukkan keputusan transisi G:C-7 A:T. Pesakit berumur 30 tahun atau kurang mempunyai kadar mutasi p53 yang lebih tinggi berbanding dengan yang berumur 30 tahun ke atas. 8agaimanapun, perubahan gen p53 dalam kajian ini telah menunjukkan tiada hubungan yang signifikan dengan umur dan jantina pesakit. Pewarnaan nukleus yang positif melalui imunohistokimia telah dicerap dalam 10 kes (20.8%), di mana 4 kes daripadanya telah menunjukkan jaluran anjakan yang abnormal dalam analisis SSCP. Dalam 4 kes tersebut, ia telah dipastikan sebagai mutasi salah erti. Ini merupakan laporan penyiasatan pertama yang melibatkan kehadiran mutasi p53 dalam tumor otak di kalangan pesakit Malaysia. Sahagian titik panas yang utama pada kodon 196, 249 dan 273 bagi gen p53 juga telah dikenal pasti terlibat dalam pesakit tumor otak di Malaysia. Pengesanan mutasi gen p53 dan pengekspresian protein p53 lebih kerap diperhatikan pada glioma yang bergred tinggi. Kajian ini menunjukkan bahawa penggunaan tanpa-isotop PCR-SSCP secara sejuk adalah merupakan asai penyaringan yang mudah, cepat dan sensitif untuk mengesan mutasi gen p53. Penemuan ini telah mengesyorkan bahawa perubahan gen p53 terlibat dalam tumorigenesis tumor otak dalam pesakit-pesakit Malaysia. Kajian ini telah memberikan penilaian data spektrum mutasi p53 dalam patogenesis tumor otak di Malaysia.
Description
Keywords
Analisis Genetik Molekul , Dalam Pesakit Tumor Otak
Citation