Analisis Genetik Molekul Dan Imunohistokimia Bagi Gen Peninoas Tumor P53 Dalam Pesakit Tumor Otak Di Malaysia
Loading...
Date
2002-04
Authors
Mohamed Yusoff, Abdul Aziz
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Progresi kanser manusia adalah hasil daripada satu kombinasi perubahan genetik
yang melibatkan proto-onkogen dan gen penindas tumor. Dalam tumor otak,
perubahan genetik yang biasa dilaporkan adalah penglibatan mutasi atau
penyahaktifan bagi gen penindas tumor p53. Untuk menentukan samada gen p53
memainkan peranan dalam onkogenesis pesakit tumor otak di Malaysia, 48 tisu tumor
sejuk beku telah dianalisa untuk mengesan kehadiran mutasi gen penindas tumor p53.
Empat kawasan titik panas dalam ekson 5 hingga 8 gen p53 telah diampifikasi melalui
tindak balas rantaian polimerase (PCR). Analisis mutasi telah dijalan ke atas produkproduk
PCR tersebut melalui penggunaan teknik tanpa-isotop polimorfisme konformasi
bebenang tunggal (SSCP) secara sejuk dan kemudiannya dipastikan melalui analisis
penjujukan DNA. Pewarnaan imunohistokimia telah dilakukan ke atas spesimenspesimen
tumor pembenaman lilin parafin dengan menggunakan antibodi monoklon
00-7 untuk pengekspresian protein p53. Kekerapan mutasi gen p53 dalam tumor otak
yang dikaji adalah 25% (12 daripada 48 kes). Enam kes (50.0%) mutasi dikesan dalam
ekson 7, E;lmpat (33.3%) mutasi dalam ekson 8 dan dua (18.1%) mutasi dalam ekson 6.
Tiada mutasi yang berlaku dalam ekson 5. Lapan (66.7%) daripada 12 kes mutasi
adalah mutasi titik nukleotida tunggal yang terdiri daripada 6 mutasi salah erti, 1 mutasi
- - -
-tak bererti dan 1 mutasi senyap. Empat yang lain (33.3%) adalah mutasi anjakan
rangka yang disebabkan oleh penambahan (3 kes) atau delesi (1 kes) bes. Di
kalangan jenis penukargantian bes, transisi dan tranversi telah menunjukkan peratusan
yang sama (50%). Dalam mutasi transisi, kesemua kes telah menunjukkan keputusan
transisi G:C-7 A:T. Pesakit berumur 30 tahun atau kurang mempunyai kadar mutasi
p53 yang lebih tinggi berbanding dengan yang berumur 30 tahun ke atas.
8agaimanapun, perubahan gen p53 dalam kajian ini telah menunjukkan tiada
hubungan yang signifikan dengan umur dan jantina pesakit. Pewarnaan nukleus yang
positif melalui imunohistokimia telah dicerap dalam 10 kes (20.8%), di mana 4 kes
daripadanya telah menunjukkan jaluran anjakan yang abnormal dalam analisis SSCP.
Dalam 4 kes tersebut, ia telah dipastikan sebagai mutasi salah erti. Ini merupakan
laporan penyiasatan pertama yang melibatkan kehadiran mutasi p53 dalam tumor otak
di kalangan pesakit Malaysia. Sahagian titik panas yang utama pada kodon 196, 249
dan 273 bagi gen p53 juga telah dikenal pasti terlibat dalam pesakit tumor otak di
Malaysia. Pengesanan mutasi gen p53 dan pengekspresian protein p53 lebih kerap
diperhatikan pada glioma yang bergred tinggi. Kajian ini menunjukkan bahawa
penggunaan tanpa-isotop PCR-SSCP secara sejuk adalah merupakan asai
penyaringan yang mudah, cepat dan sensitif untuk mengesan mutasi gen p53.
Penemuan ini telah mengesyorkan bahawa perubahan gen p53 terlibat dalam
tumorigenesis tumor otak dalam pesakit-pesakit Malaysia. Kajian ini telah memberikan
penilaian data spektrum mutasi p53 dalam patogenesis tumor otak di Malaysia.
Description
Keywords
Analisis Genetik Molekul , Dalam Pesakit Tumor Otak