Pengklonan Dan Pengekspresan Gen 24.1 Kda Yang Spesifik Dan Antigenik Bagi Campylobacter jejuni

Loading...
Thumbnail Image
Date
2008-04
Authors
Amir Musa, Azni
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universiti Sains Malaysia
Abstract
Campylobacter jejuni adalah spesis enteropatogen yang paling utama di dalam keluarga Campylobacter dan merupakan salah satu agen penting yang menyebabkan cirit birit pada manusia di seluruh dunia. Walaupun jangkitan bakteria ini boleh dipulihkan tanpa rawatan, ia sering kali dikaitkan dengan komplikasi yang lebih rumit seperti sindrom Guillain-Barre. Akibat daripada masalah teknikal yang wujud bagi kaedah konvensional yang sedia ada termasuk kekurangan sensitiviti, mahal, melibatkan proses kerja yang cerewet, memakan masa yang panjang dan jumlah pemencilan yang amat rendah; satu ujian yang pantas, spesifik dan mudah amat diperlukan. Di dalam kajian yang terdahulu, satu protein natif yang spesifik terhadap C. jejuni yang beratnya 24.1 kDa, telah dikenalpasti dan merupakan calon yang sesuai untuk membangunkan ujian pantas berasaskan protein. Untuk menggunakan protein ini bagi pembangunan ujian pantas berasaskan protein, ia perlu ditulenkan dalam kuantiti yang banyak. Oleh kerana penghasilan protein natif adalah rumit, mahal dan mengambil masa yang lama, ia perlu dihasilkan secara rekombinan. Melalui kaedah ini, proses penghasilan dan penulenan protein sasaran menjadi lebih mudah dan ekonomik. Di dalam kajian ini, gen yang mengkodkan protein ini telah diklonkan dan diekspresikan di dalam sistem E. coli dan penulenan dilakukan dengan menggunakan sistem ”Ni-NTA affinity chromatography”. Ketulenan, antigenisiti dan spesifisiti protein rekombinan yang telah dihasilkan ini ditentukan melalui kaedah blot Western dengan menggunakan serum pesakit yang dijangkiti Campylobacter, jangkitan enterik lain dan serum daripada individu yang sihat. Kesesuaian protein rekombinan seterusnya diuji dengan menjalankan ujian titik EIA yang mengambil masa 3 jam. Daripada keputusan awal kajian ini, ujian titik EIA menunjukkan sensitiviti sebanyak 100% dan spesifisiti 97% untuk mengesan IgA terhadap C. jejuni di dalam serum pesakit yang digunakan. Ini menandakan protein rekombinan yang diekspresikan ini merupakan calon yang sesuai di dalam penghasilan ujian alternatif untuk mengesan kehadiran antibodi terhadap jangkitan C. jejuni.
Description
Keywords
Pengklonan dan pengekspresan gen 24.1 kda yang spesifik , dan antigenik bagi campylobacter jejuni
Citation